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【传经送宝】中国食品企业【环境中微生物的检测】技巧!

2023-10-10 17:44:44  点击量:

1 目的

检测生产车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设备的微生物指标,生产区域环境当中病原微生物的监控,达到规定标准,以控制食品成品的质量。

2 范围

本标准操作程序规定了生产环境中微生物的检测流程及参考依据。

3 参考标准

空气沉降菌参考标准:

GBT 16294-2010 医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法  

食品接触面参考标准:

GB 15979-2002 一次性使用卫生用品卫生标准 中附录E 生产环境采样与测试方法

限值要求参考标准:

DBS 43/007-2018 米粉生产卫生规范 附录A 米粉生产过程微生物监控要求      

DBS 43/008-2018 湿面生产卫生规范 附录A 湿面加工过程微生物监控要求

DBS 43/009-2018 气调包装酱卤肉制品生产卫生规范 附录A 气调包装酱卤肉制品加工过程微生物监控要求

4 空间沉降菌的检测

4.1 实验仪器与药品

4.1.1 生产企业提供的文件 

——高压灭菌锅

——恒温干燥箱

——电热恒温培养箱:36±1℃

——平板计数琼脂

——培养皿:f90mm

——75%酒精

——取样支撑架:高度约1m(可用桌面代替)

 

 

4.1.2 产品的交货验收 

对每批产品,应记录接收日期,并检查: 

——产品合格证明; 

——包装的完整性; 

——产品的有效期; 

——文件的提供。

 

4.2.取样点的确定

室内面积不超过30 m2,在对角线上设里、中、外三点,里、外点位置距墙1 m;

 

室内面积超过30 m2,设东、西、南、北、中五点,周围4点距墙1 m;

 

 

4.3 平皿的准备

——按取样点数量准备好培养皿及平板计数琼脂,放入高压灭菌锅内灭菌;

——灭菌后取出培养皿放入恒温干燥箱内烘干,冷却后备用;

——在超净工作台内将每个培养皿中加入15~20ml的培养基,待培养基凝固后方可取样。

 

4.4 采样

检验员采样前,首先对双手用酒精消毒。再对平皿表面消毒。

注意:喷洒酒精时,培养皿需要密闭,不得使酒精进入培养皿内部。

采样时,将含平板计数琼脂培养基的平板置采样点(距离地面约1m高度),并避开空调、门窗等空气流通处,打开平皿盖,使平板在空气中暴露X min(静态大于30分钟,动态不高于4小时);

 

4.5 培养

——将已采集样品的培养基平皿翻转,置36℃±1℃恒温培养箱培养48 h后计数。

——同时做空白试验。

分别从初始和最终制备的培养基中抽取或制备至少一个(或1%)平板或试管,置相同条件下培养。

 

4.6 计数

根据GB/T 16294 医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法:

直接计算各平皿的平均值

 

单位:CFU/皿

参考:

——奶粉厂≤100 CFU/4h(φ90mm)

——水厂≤0.75 CFU/30min(φ90mm)(10个检测点)

——米粉企业≤30CFU/皿

——湿面企业≤300CFU/皿

——气调包装酱卤肉企业≤300CFU/皿/30min

 

5 食品接触面微生物涂抹实验

5.1 实验仪器与药品

——高压灭菌锅

——恒温干燥箱

——电热恒温培养箱:36±1℃

——培养基:菌落总数----平板计数琼脂    大肠菌群----乳糖胆盐发酵管(双料)

——培养皿:f90mm

——75%酒精

——0.85%生理盐水

——医用棉签

——蓝盖瓶:250ml

 

5.2 取样前的准备

按下表准备物品,并灭菌备用

 

 

5.3 取样

——检验员采样前,首先对自己的双手用酒精消毒;

——蓝盖瓶开盖前需用酒精对其表面消毒。

——样品采集

工作台面:用浸湿生理盐水的棉签在待测物体表面(取与食品直接接触或有一定影响的表面)来回涂擦10次,共计粘贴25cm2 的面积;

人员手部:被检人五指并拢,用浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面,从指尖到指端来回涂擦10次;

注:

1.可采用多个棉签擦拭同一部位,擦拭时棉签要随时转动,保证擦拭的准确性。

2.剪去(或折断)手接触部分棉棒,将棉签放至装有10ml生理盐水试管中,充分震荡

 

5.4 采样注意事项

——棉签在涂抹时,棉签保持湿润而无液体成滴滴下;

——对每个擦拭点应详细记录所在采样点的具体位置、擦拭时间及所擦拭环节的消毒时间;

——采样后必须尽快对样品进行相应指标的检测,送检时间不得超过6h,若样品保存于0~4℃条件时,送检时间不得超过24h;

——清洁消毒或加工前后各取一份样品,对卫生管理的评估更合适。

 

5.5 培养

——如污染严重,可十倍递增稀释,吸取1ml 原液加9ml无菌生理盐水中,混匀,此液为1:10稀释液。

——菌落总数

以无菌操作,选择1~2个稀释度各取1ml样液分别注入到无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿(平行样),将已融化冷至45℃左右的平板计数琼脂培养基倾入平皿,每皿约15ml,充分混合。

同时做空白试验。

待琼脂凝固后,将平皿翻转,置36℃±1℃恒温培养箱培养48 h后计数。

——大肠菌群

以无菌操作,取样液10ml接种到双料乳糖胆盐发酵管,置36℃±1℃培养24h。

 

5.6:结果报告

——菌落总数

 

Y1--工作台面细菌菌落总数, 单位:CFU/cm2

Y2--人员手部细菌菌落总数,  单位:CFU/手

A--适宜计数稀释度平板上平均细菌菌落数

K--稀释倍数

S--采样面积(25cm2)

结果保留整数

 

——大肠菌群

如乳糖胆盐发酵管不产气,则报告为大肠菌群阴性;

如乳糖胆盐发酵管产气,则接种到乳糖发酵管内,于36±1℃培养24h;

观察产气情况。凡乳糖发酵管最终产气即可报告为大肠菌群阳性

 

6. 限值参考

 

 

 

 

7. 本企业内控指标如下:

 

监控项目

监控取样点

监控微生物指标

监控频率

监控指标限值

         
         
         
         
         
         
         
         

文章来源:食品论坛网友 陈靓静、杨盼盼 分享,仅供参考

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